基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜電泳檢測試劑盒的使用注意事項

MMP檢測注意事項：細(xì)胞培養(yǎng)基要用無血清培養(yǎng)基；樣本裂解時不含EDTA,明膠酶譜的活性受鈣離子，鋅離子，和PH值等因素的影響，因此緩沖液 配制應(yīng)嚴(yán)格準(zhǔn)確，盡量用超純水，孵育溫度也掌握好。因為檢測蛋白活性,所以應(yīng)盡量避免蛋白變性,一般都要求冰上操作,電泳也放在冰水里進(jìn)行的。

注意事項說明：

1.制備聚丙烯酰胺時應(yīng)注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子，鋅離子，和PH值等因素的影響，因此緩沖液配制應(yīng)嚴(yán)格準(zhǔn)確，盡量用超純水，孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子。

4.孵育液的PH在7.5-7.6，復(fù)性的TRITON時間長了會有絮狀物，所以實驗時盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中，因為會改變孵育液的PH值，在普通孵箱即可。

6.明膠要4度保存，配好后1周內(nèi)使用。

7.樣本活性低可以延長孵育時間到48小時

基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜電泳檢測試劑盒的使用注意事項