操作明膠酶譜試劑盒的時(shí)候特別重要的一步是什么？

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很多老師在使用明膠酶譜試劑盒的時(shí)候電泳總是跑不好，要么是時(shí)間很短，要么是跑不開(kāi)等，今天我們把跑電泳的幾個(gè)注意事項(xiàng)分享給大家。

1、跑電泳的時(shí)候，每一塊小膠電流為20 mA/gel，如果您跑2塊，增加到30mA左右，膠的數(shù)量增加，電流也需要增加，一般需要跑3-6小時(shí)，慢慢壓。

2、恒流了 電壓就是自動(dòng)的了

3、明膠跑的蛋白是非變性的

4、配的下層膠孔徑稍大

5、跑的時(shí)候多跑會(huì)兒，條帶之間拉得開(kāi)些，為作圖時(shí)給各條帶添加文字留出足夠的空間。

做明膠酶譜法實(shí)驗(yàn)的其他注意事項(xiàng)：

1.制備聚丙烯酰胺時(shí)應(yīng)注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子，鋅離子，和PH值等因素的影響，因此緩沖液配制應(yīng)嚴(yán)格準(zhǔn)確，盡量用超純水，孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子

4.孵育液的PH在7.5-7.6，復(fù)性的TRITON時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)有絮狀物，所以實(shí)驗(yàn)時(shí)盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中，因?yàn)闀?huì)改變孵育液的PH值，在普通孵箱即可。

精華篇：明膠酶譜分析試劑盒跑電泳的時(shí)候有什么注意事項(xiàng)

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操作明膠酶譜試劑盒的時(shí)候特別重要的一步是什么？