甲基化檢測MSP

服務(wù)介紹：原理為用亞硫酸氫鈉修飾處理基因組DNA，未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(C)被轉(zhuǎn)化為尿-嘧啶(U)，而甲基化的胞嘧啶則不變。據(jù)此設(shè)計針對甲基化和非甲基化序列的引物進行PCR。通過電泳檢測MSP擴增產(chǎn)物，如果用甲基化的引物能得到擴增片，,則說明該位點存在甲基化。反之，說明被檢測的位點不存在甲基化。若兩對引物均能得到陽性PCR產(chǎn)物，則說明該片段部分甲基化。

　　實驗流程：

取材-提取基因組DNA-亞硫酸氫鹽處理-純化DNA- MSP引物合成-PCR擴增-電泳-數(shù)據(jù)分析-發(fā)報告

送樣運輸要求：

動物組織：新鮮的組織量100 mg(黃豆大小)，少50 mg（綠豆大?。?，脂肪組織、結(jié)締組織、纖維化組織適當(dāng)增加。干冰運輸。

植物組織：新鮮的葉、果肉、種子等少需100 mg。干冰運輸。

細(xì)胞：1×10^6個細(xì)胞，收集細(xì)胞沉淀，干冰運輸。

全血：少1 mL新鮮血液EDTA抗凝管，-20度運輸。

DNA：體積≥50 uL，濃度≥ 50 ng/uL。

注：植物樣本的甲基化實驗需要客戶提供具體的啟動子序列信息。