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銅鋅超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理：后者氧化羥胺形成通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基(O2ˉ），亞硝酸鹽,在顯色劑的作用下呈現(xiàn)紫紅色,用可見光分光度計(jì)測(cè)其吸光度,當(dāng)被測(cè)樣品中含SOD時(shí),則對(duì)超氧陰離子自由基有專一性的抑制作用,使形成的亞硝酸鹽減少,比色時(shí)測(cè)定管的吸光度值低于對(duì)照管的吸光度值,通過公式計(jì)算可求出被測(cè)樣品中的SOD活力。
植物體中SOD可分為3種類型:即銅鋅SOD( CuZn-SOD)錳SOD( Mn-SOD)和鐵SOD( Fe-SOD)。低等植物以 Fe-SOD和Mn-SOD為主,高等植物以CuZn-SOD為主,CuZn-SOD主要位于細(xì)胞質(zhì)和葉綠體中, Mn-SOD主要位于線粒體,FcoD一般位于一些植物的葉綠體中。三者相加等于總SOD(TOD)。經(jīng)樣本前處理過的樣本中Mn-SOD和Fe-SOD活力喪失,但 CuZn-SOD活力不變。

SOD 屬于金屬酶，按照結(jié)合金屬離子種類不同，該酶有以下三種：含銅與鋅超氧化物歧化酶（ CUZNSOD ）、含錳超氧化物歧化酶（ MN —— SOD ）和含鐵超氧化物歧化酶（ Fe —— SOD ）。
三種 SOD 都催化超氧化物陰離子自由基歧化生成*與氧氣。螺旋藻蛋白質(zhì)同時(shí)含有多種重要的酶，其中為重要的是超氧化物歧化酶，即SOD。
植物體中SOD可分為3 種類型：即銅鋅-SOD（CuZn-SOD）、錳-SOD（Mn-SOD）和鐵-SOD（Fe-SOD）。低等植物以Fe-SOD 和Mn-SOD 為主，高等植物以CuZn-SOD為主，CuZn-SOD主要位于細(xì)胞質(zhì)和葉綠體中，Mn-SOD主要位于線粒體中，F(xiàn)e-SOD一般位于一些植物的葉綠體中。三者相加等于總SOD（T-SOD）。經(jīng)樣本前處理過的樣本中Mn-SOD和Fe-SOD活力喪失，但CuZn-SOD活力不變。產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
所需自備儀器和試劑： 1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器6、冰乙酸（AR級(jí) 乙酸含量99%以上）

銅鋅超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）實(shí)驗(yàn)代測(cè)