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乙酰膽堿轉移酶（ChAT）實驗代測

乙酰膽堿轉移酶（ChAT）為膽堿能神經(jīng)元的標志酶，在神經(jīng)細胞體內(nèi)合成。
乙酰膽堿是調(diào)節(jié)食道平滑肌運動的主要興奮性神經(jīng)遞質(zhì)。食道平滑肌收縮主要是由于乙酰膽堿釋放引起，而乙酰膽堿轉移酶和乙酰膽堿脂酶分別是Ach的合成酶和水解酶，調(diào)節(jié)Ach的代謝。食道組織中這兩個酶的活力代表了食管內(nèi)源性膽堿能神經(jīng)功能狀態(tài)。乙酰膽堿是延髓脊運動神經(jīng)元，自主神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)節(jié)前纖維，神經(jīng)節(jié)后膽堿能纖維，以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)許多神經(jīng)元的主要神經(jīng)遞質(zhì)。它是通過膽堿乙酰轉移酶的作用，由膽堿與來處線粒體的乙酰輔酶A所合成。在獲得釋放后，乙酰膽堿刺激特殊的膽堿能受體，這種相互作用很快被局部的膽堿酯酶所終止，后者使乙酰膽堿被除數(shù)水解為膽堿與乙酸鹽。乙酰膽堿的水平由膽堿乙酰轉移酶和膽堿的攝取所控制。
產(chǎn)品優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約1小時，可測50例左右樣本。
2、取樣量微：本法取樣量僅為25l。
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%。
5、回收試驗： X =102%。
6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
所需儀器及自備試劑：
1、紫外分光光度計（比色測定波長為324nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱（溫度為37℃）以及沸水鍋 （溫度為100℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
操作流程：
1、按說明書操作將配好的混合液37℃水浴5分鐘后加樣本25ul
2、37°C水浴20分鐘，100°C沸水水浴2分鐘終止反應，加雙蒸水
3、混勻,4000 r/min離心10分鐘取上清加R7
4、靜置15分鐘，324nm波長，2mm光徑，比色

乙酰膽堿轉移酶（ChAT）實驗代測