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葉綠素實(shí)驗(yàn)代測(cè)

分光光度法 
注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。 
測(cè)定意義： 
植物葉綠素廣泛存在于綠色植物組織中，其含量與光合作用、營(yíng)養(yǎng)狀況密切相關(guān)，是反應(yīng)植物生長(zhǎng)狀況的重要指標(biāo)。 
測(cè)定原理： 
葉綠素a和葉綠素b在645nm和663nm處有大吸收，根據(jù)葉綠素提取液對(duì)可見(jiàn)光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在量大吸收波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，從而計(jì)算葉綠素a、葉綠素b和總?cè)~綠素含量。
葉綠素，是高等植物和其它所有能進(jìn)行光合作用的生物體含有的一類綠色色素。葉綠素a 和葉綠素b 均可溶于乙醇、和丙酮等溶劑，不溶于水，因此，可以用極性溶劑如丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等提取葉綠素
基本簡(jiǎn)介
葉綠素，是植物進(jìn)行光合作用的主要色素，是一類含脂的色素家族，位于類囊體膜。葉綠素吸收大部分的紅光和紫光但反射綠光，所以葉綠素呈現(xiàn)綠色，它在光合作用的光吸收中起核心作用。葉綠素為鎂卟啉化合物，包括葉綠素a、b、c、d、f以及原葉綠素和細(xì)菌葉綠素等。葉綠素不很穩(wěn)定，光、酸、堿、氧、氧化劑等都會(huì)使其分解。酸性條件下，葉綠素分子很容易失去卟啉環(huán)中的鎂成為去鎂葉綠素。葉綠素有造血、提供維生素、解毒、抗病等多種用途。
 

化學(xué)結(jié)構(gòu)
葉綠素分子結(jié)構(gòu)
葉綠素a19世紀(jì)初，化學(xué)家、色層分析法創(chuàng)始人M.C.茨韋特用吸附色層分析法證明高等植物葉子中的葉綠素有兩種成分。德國(guó)H.菲舍爾等經(jīng)過(guò)多年的努力，弄清了葉綠素的復(fù)雜的化學(xué)結(jié)構(gòu)。1960年美國(guó)R.B.伍德沃德的實(shí)驗(yàn)室合成了葉綠素a。至此，葉綠素的分子結(jié)構(gòu)得到定論。
葉綠素分子是由兩部分組成的：核心部分是一個(gè)卟啉環(huán)(porphyrin ring)，其功能是光吸收；另一部分是一個(gè)很長(zhǎng)的脂肪烴側(cè)鏈，稱為葉綠醇(phytol)，葉綠素用這種側(cè)鏈插入到類囊體膜。與含鐵的血紅素基團(tuán)不同的是，葉綠素卟啉環(huán)中含有一個(gè)鎂原子。葉綠素分子通過(guò)卟啉環(huán)中單鍵和雙鍵的改變來(lái)吸收可見(jiàn)光。各種葉綠素之間的結(jié)構(gòu)差別很小。如葉綠素a和b僅在吡咯環(huán)Ⅱ上的附加基團(tuán)上有差異：前者是甲基，后者是甲醛基。細(xì)菌葉綠素和葉綠素a不同處也只在于卟啉環(huán)Ⅰ上的乙烯基換成酮基和環(huán)Ⅱ上的一對(duì)雙鍵被氫化。

葉綠素實(shí)驗(yàn)代測(cè)