H+K+ -ATP 酶活力測(cè)試盒

二、樣本前處理

準(zhǔn)確稱(chēng)取胃粘膜組織重量，按重量（g）:體積（mL）=1:9

的比例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下制備成 10%

的組織勻漿液，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清液，再用生

理鹽水 5 倍稀釋成 2%的濃度待測(cè)。

六、測(cè)試原理：

ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及無(wú)機(jī)磷，測(cè)定無(wú)機(jī)磷

的量可判斷 ATP 酶活力的高低。H ＋K ＋ -ATP 酶是一種能被

鉀專(zhuān)一激活而不被烏本苷抑制的 ATP 酶。

七、注意事項(xiàng)：

1、具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。所以對(duì)測(cè)定所用試管要

求嚴(yán)格，要沒(méi)有一點(diǎn)磷，若試管放過(guò)磷酸或磷酸緩沖液，

一定要洗得非常干凈，即先用洗潔精加水煮，再用自來(lái)

水沖，最后用雙蒸水沖干凈。用一次性塑料管或新

玻璃管，避免磷污染是檢測(cè)成敗的關(guān)鍵。

2、定磷劑配好后，不可放置太久，一般保存 1～5 天，

現(xiàn)用現(xiàn)配。隨時(shí)放冰箱。

3、采用先配 A、B 兩種混合液，然后按簡(jiǎn)化操作步驟

檢測(cè)。這樣快捷、準(zhǔn)確。

4、所有配試劑的器皿均要專(zhuān)用，包括吸硫酸的吸管及盛水

的器皿。

八、測(cè)定意義：

H ＋K ＋ -ATPase 對(duì)胃酸的分泌及胃的消化功能具有重要

的生理意義，70 年代 Forte 等人首先在牛蛙的胃粘膜上分

離出一類(lèi)能被 K ＋專(zhuān)一激活而不被烏本苷抑制的 ATPase 即

H ＋K ＋ -ATPase，隨后 Lee·j 等人又證明了含有該酶的膜囊泡

運(yùn)動(dòng)跨膜運(yùn)輸質(zhì)子的作用，從而為胃酸分泌的機(jī)理奠定了

分子學(xué)基礎(chǔ)，H ＋K ＋ -ATPase 定位于胃粘膜壁細(xì)胞（Parietal

lell）上，屬于第二類(lèi)質(zhì)子泵，它通過(guò)自身的磷酸化（E1→E2）

與去磷酸化（E2→E1）完成的 H ＋ /K ＋電中性（electroneutral）

跨膜離子轉(zhuǎn)運(yùn)，不斷將壁細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)子運(yùn)輸?shù)侥ね庑惺姑?/span>

酸的功能。

H+K+ -ATP 酶活力測(cè)試盒