糜-蛋白酶測(cè)試盒 

一、測(cè)定意義：

糜-蛋白酶又稱胰-凝乳蛋白酶(Chymotrypsin)，系從?；蜇i胰中提取的一種蛋白水解酶，具有肽鏈內(nèi)切酶的作用，通過(guò)切斷蛋白質(zhì)肽鏈中酪-氨酸、苯丙-氨酸的羧端肽鏈作用，專一水解羧端芳香族氨基酸(酪-氨酸、色-氨酸、亮-氨酸)或側(cè)鍵大體積疏水性殘基甲-硫氨酸等?？梢苑纸庋装Y部位纖維蛋白的凝結(jié)物，促進(jìn)血凝塊、膿性分泌物及壞死組織的溶化分解，從而凈化創(chuàng)面，使肉芽組織新生，促進(jìn)傷口愈合。其在眼科、皮膚科做臨床局部應(yīng)用已被肯定，也可用于創(chuàng)口或局部炎癥，以減少局部分泌和水腫。近年來(lái)隨著臨床藥理學(xué)研究的不斷發(fā)展．其臨床應(yīng)用范圍也日漸廣泛。

二、測(cè)定原理：

以酪蛋白為底物，糜-蛋白酶可水解蛋白產(chǎn)生含酚的氨基酸，而酚試劑可被含酚的氨基酸還原成藍(lán)色物質(zhì)，通過(guò)比色可測(cè)定糜-蛋白酶活力。

三、試劑盒組成與配制：（50 管/24 樣）

試劑一：液體 24mL×1 瓶，4℃保存 3 個(gè)月。

試劑二：液體 6mL×2 瓶，4℃保存 1 個(gè)月。

試劑三：液體 100mL×1 瓶，4℃保存 3 個(gè)月。

試劑四：液體 9mL×2 瓶， 4℃避光保存 2 個(gè)月。

試劑五：1mg/mL 酪-氨酸標(biāo)準(zhǔn)品貯備液 1mL×1 瓶，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 20mL×1 瓶，4℃保存 1 個(gè)月。

50μg/mL 標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液的配制：取 1mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)品貯備液 50μL 用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液稀釋至 1mL，即 1︰19（體積比）稀釋，充分混勻后，4℃可保存 10 天以上。

試劑六：勻漿介質(zhì) 60mL×2 瓶，4℃保存 1 個(gè)月。

四、操作步驟：

1、樣本前處理：、

組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量（g）:體積(mL)=1:9 的比例，加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì)，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，制成 10%的組織勻漿，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清液進(jìn)行預(yù)試后根據(jù)活力大小或直接進(jìn)行檢測(cè)或用勻漿介質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)稀釋后測(cè)定。（預(yù)試結(jié)果請(qǐng)參考附錄中的標(biāo)準(zhǔn)曲線）

2、樣本及試劑在測(cè)試前均要平衡至室溫（室溫在 20℃以上可放置室溫；室溫在 20℃以下，可將試劑置于 37℃水浴中預(yù)溫 10 分鐘）。

 糜-蛋白酶測(cè)試盒