支原體-染色液(Dienes)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

支原體染色液(Dienes染色液)是一種經(jīng)典的利用天青美藍(lán)染色檢測(cè)支原體污染的試劑，

經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞以及組織切片的細(xì)胞凋亡檢測(cè)，該試劑檢測(cè)細(xì)胞含量范圍一

般為 0.1～1×106 之間，Dienes 染色液亦可用于泌尿生殖道感染細(xì)菌的染色鑒別。該試劑

僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、PBS 或生理鹽水

2、載玻片、蓋玻片

3、顯微鏡

操作步驟(僅供參考)：

(一)貼壁細(xì)胞

1、取潔凈蓋玻片在 70%乙醇中浸泡 5 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)吹干或用無(wú)菌 PBS

或生理鹽水洗滌 3 次，再用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌 1 次。

2、將蓋玻片置于 6 孔板或其他培養(yǎng)皿內(nèi)，接種細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)夜，使融合率約為 50%～80%。

3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面，孵育 1～2min。

4、棄染色液，PBS 或生理鹽水洗 2 次，每次 3min，吸盡液體。

5、顯微鏡下觀察。

(二)懸浮細(xì)胞

1、低速離心后吸去大部分液體保留約 50μl 液體，再緩緩懸起細(xì)胞，滴加至載玻片上，盡

量使細(xì)胞分布均勻。

2、稍晾干，使細(xì)胞貼在載玻片上不易隨液體流動(dòng)。

3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面，孵育 1～2min。

4、棄染色液，PBS 或生理鹽水洗 2 次，每次 3min，吸盡液體。

(三)懸浮細(xì)胞

1、用棉試子在載玻片上涂一層 Dienes 染色液，待干。

2、挑取細(xì)菌，置于載玻片上。

3、覆蓋玻片，密封，觀察菌落形態(tài)。

(四)支原體菌落

1、將

3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面，孵育 1～2min。

4、棄染色液，PBS 或生理鹽水洗 2 次，每次 3min，吸盡液體。

染色結(jié)果：

支原體菌落呈藍(lán)色，L 型細(xì)菌菌落在短時(shí)間內(nèi)呈藍(lán)色，但 30~60min 后逐漸褪色，呈無(wú)色。

注意事項(xiàng)：

1、在為了獲得細(xì)胞沉淀的離心的過(guò)程中，對(duì)于特殊細(xì)胞，如果細(xì)胞沉淀不充分，可以適當(dāng)

提高離心力或延長(zhǎng)離心時(shí)間。

2、如染色太深不宜觀察，可用蒸餾水將染液稀釋 50~300 倍。

3、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：12 個(gè)月有效。

支原體-染色液(Dienes)