高鐵血紅蛋白（MetHb）測試盒

一、試劑組成及配制：（50T/48 樣）

試劑一：血紅蛋白測定濃縮液 1mL×2 支，2～8℃保存。

血紅蛋白測定應(yīng)用液的配制：臨用前將濃縮液用雙蒸水

1∶99 稀釋，即 100 倍稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配。配好

的試劑 2～8℃避光保存，可存放 1 個月以上。

試劑二：高鐵血紅蛋白測定濃縮液，30mL×1 瓶，2～8℃

保存。

高鐵血紅蛋白測定應(yīng)用液的配制：濃縮液∶雙蒸水＝

1∶9 稀釋，即 10 倍稀釋，可存放 6 個月以上。

試劑三：制作還原血紅蛋白曲線用

①、白色粉劑×1 支，2～8℃避光保存。

②、稀釋液，1mL×1 支，2～8℃保存。

試劑三應(yīng)用液配制：臨用前每支粉劑加入 1mL 稀釋液，

現(xiàn)用現(xiàn)配，注意避光。

試劑四：制作高鐵血紅蛋白曲線用

①、磚紅色粉劑×1 支，2～8℃避光保存

②、稀釋液，1mL×1 支，2～8℃保存。

試劑四應(yīng)用液配制：臨用前每支粉劑加入 1mL 稀釋液，

現(xiàn)用現(xiàn)配，注意避光。

二、試劑組成及配制：（100T/96 樣,貨號 A102-1-2）

試劑一：血紅蛋白測定濃縮液 1mL×4 支，2～8℃保存。

血紅蛋白測定應(yīng)用液的配制：臨用前將濃縮液用雙蒸水

1∶99 稀釋，即 100 倍稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配。配好的

試劑 2～8℃避光保存，可存放 1 個月以上。

試劑二：高鐵血紅蛋白測定濃縮液，60mL×1 瓶，2～8℃

保存。

高鐵血紅蛋白測定應(yīng)用液的配制：濃縮液∶雙蒸水＝

1∶9 稀釋，即 10 倍稀釋，可存放 6 個月以上。

試劑三：制作還原血紅蛋白曲線用

①、白色粉劑×1 支，2～8℃避光保存。

②、稀釋液，1mL×1 支，2～8℃保存。

試劑三應(yīng)用液配制：臨用前每支粉劑加入 1mL 稀釋液，

現(xiàn)用現(xiàn)配，注意避光。

試劑四：制作高鐵血紅蛋白曲線用

①、磚紅色粉劑×1 支，2～8℃避光保存

②、稀釋液，1mL×1 支，2～8℃保存。

試劑四應(yīng)用液配制：臨用前每支粉劑加入 1mL 稀釋液，

現(xiàn)用現(xiàn)配，注意避光。

三、操作步驟：

1、制備抗凝全血：取全血立即加入到肝素抗凝管內(nèi)，加

蓋封口，輕輕顛倒混勻。

2、血紅蛋白含量的測定：取 0.01mL 全血與 2.5mL 的 100

倍稀釋的試劑一應(yīng)用液（血紅蛋白測定應(yīng)用液），混

勻，靜置 5 分鐘后，1cm 光徑，雙蒸水調(diào)零，540nm

處測定各管吸光度值。

3、高鐵血紅蛋白測定： 取 0.05mL 全血，加入 2.5mL

的試劑二稀釋應(yīng)用液（即高鐵血紅蛋白測定應(yīng)用液），

混勻，靜置 5 分鐘后，1cm 光徑，雙蒸水調(diào)零，測定

630nm 處及 602nm 處吸光度值。如果沒有雙波長的

分光光度計則可以先測定各管 630nm 處吸光度值，

然后再測各管 602 nm 處吸光度值。但一定要注意各

管的編號不要弄錯。

五、注意事項：

①、取血后應(yīng)在 1 小時內(nèi)完成實驗，否則影響測定結(jié)果，

因為紅細(xì)胞中的還原酶可使高鐵血紅蛋白逐漸還

原，使結(jié)果降低。但可放-20℃以下冷凍保存，如果

血樣較多，可將全血分成幾小管，每次測試可取其

一小管，余下各管仍保存-20℃以下以備重復(fù)測試，

其結(jié)果不受影響。

②、本實驗可用雙波長分光光度計測定，可同時測定

602nm 處及 630nm 處吸光度值，進行計算。也可用

單波長分光光度計測定，可以先測定各管 630nm 處

吸光度值，然后再測各管 602 nm 處吸光度值。但

一定要注意各管的編號不要弄錯。

③、如果您實驗室分光光度計沒有雙波長掃描功能，可

以不做標(biāo)準(zhǔn)曲線，直接用本所實驗室 R 與 r 均為常

數(shù)，R=1.81；r=0.14。

④、所用器皿要干凈。

七、檢測意義：

體內(nèi)一氧化氮彌散入血后，很快與氧合血紅蛋白結(jié)合形

成高鐵血紅蛋白（methemoglobin，MetHb），NO 與 MetHb 變

化相關(guān)，故全血 MetHb 檢測近年來受到臨床的廣泛重視。同

時血液中高鐵血紅蛋白含量的測定對接觸芳香族氨基、硝基

化合物所引起的中毒性疾病的診斷與治療，有重要的意義。

八、測定原理：

高鐵血紅蛋白在 630nm 波長處有一特征吸收峰，而高鐵

血紅蛋白（MetHb）和還原血紅蛋白（Hb）在 602nm 波長處

光密度值相等，利用此關(guān)系可以通過相應(yīng)的公式算出高鐵血

紅蛋白含量。

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