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胃蛋白酶實驗代測

測定原理： 
胃蛋白酶可催化血紅蛋白水解，水解產物與福林試劑反應后顯藍色；一定范圍內，其顏色的深淺與胃蛋白酶活性呈正比。 
胃蛋白酶（英文名稱：Pepsin）是一種消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主細胞（gastric chief cell）所分泌，功能是將食物中的蛋白質分解為小的肽片段。主細胞分泌的是胃蛋白酶原，胃蛋白酶原經胃酸或者胃蛋白酶刺激后形成胃蛋白酶，胃蛋白酶不是由細胞直接生成的。
胃蛋白酶原由胃底主細胞分泌，在PH 1.5-5.0條件下，被活化成胃蛋白酶，將蛋白質分解為胨，一部分被分解為酷氨酸、苯丙酸等氨基酸。胃液胃蛋白酶測定可用于鑒別神經性低酸癥和胃性低酸癥，當胃酸過少或缺乏時，前者胃蛋白酶的含量有時正常而后者鹽酸與胃蛋白酶同時缺乏。一般認為胃性低酸癥是由于胃粘膜的重癥器質性變化所致，研究具有重要的參考意義。胃癌、性胃炎、慢性胃炎、慢性胃擴張、慢性十二脂腸炎、惡性貧血以及功能減退等胃蛋白酶的分泌常減少。一般胃酸基礎分泌高的，如十二脂腸潰瘍等，胃蛋白酶活性增高。
胃蛋白酶可水解蛋白產生含酚的氨基酸，而酚試劑可被含酚的氨基酸還原成藍色物質，通過比色可測定胃蛋白酶活力。
產品優(yōu)點如下：
1、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放1個月有效。
2、再現性好：變異系數CV=1.7%。
3、回收試驗： X =104%。
4、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
5、測試范圍：可測動物胃液、組織等。
所需儀器及自備試劑：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為660nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
胃液: 先做預試，再根據活力大小進行取樣操作
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
操作流程：
1、按步驟加入樣本和R1、R2, 37℃準確水浴10分鐘
2、測定管加入R1, 37℃水浴10分鐘，3500轉/分離心10分鐘
3、取上清加R3、R4,37℃水浴20分鐘
4、660nm波長，1cm光徑，比色

胃蛋白酶實驗代測